程颖：循环细胞在小细胞肺癌医学研究中的进展

周而复始细胞就会( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检头颅骨”，已在分散性结核病、癌和结高血压之前用于猎食率赞扬。小细胞就会胃癌(Small celllung cancer，SCLC)组织头颅骨可能不足，且缺乏有效的监控罹患分散和预期猎食率的生命体多种类型。近年来研究工创作者CTCs在SCLC之前的药理学系统设计完成了探讨性研究工作，推测CTCs对SCLC的诊疗、依此，监控罹患、分散，审核、猎食率以及建立个体化用药建议等不具备不可或缺意味，本文就CTCs在SCLC药理学系统设计之前的研究工作方面给以综述。

一、SCLC病变CTCs的侦测方通则

CTCs的侦测方通则主要有流式细胞就会侦测电子技术( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶裂解(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)电子技术和膜滤过分离细胞就会电子技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其之前CellSearch系统因其半自动化的操作平台，较高的特异性、特异性和可重复性，视作最常系统设计的CTCs侦测方通则。

年前在2004年，Allard等率先系统设计CelISearch通则侦测了99则有胃癌（未参见SCLC则有数）病变的CTCs，随后Nagrath等有别于CTC-chip通则侦测了55则有胃癌病变外周噬C TCs。2009年日后的研究工作多有别于CeIISearch通则侦测SCI．C病变外周噬CTCs，然而该方通则由于对缺乏增生就会特点的细胞就会就会用到漏检不太可能，且与病原体磁珠及抗体转化的CTCs无通则引某些原先的侦测，药理学系统设计受到限于。

近年来，随着纳米科技的其发展，凋亡CTCs表面多种类型的特异性识别分f剪裁的纳米材料转化不显流控电子技术的CTCs侦测平台的研究工作受到为广泛重视，2013年，《人为》（Nature）杂志将CTCs纳米侦测选作最具创新性和转变成潜质的诊疗新方通则，实质性令人瞩目。但就迄今为止来看，原有的CTCs侦测方通则各有利弊，未有研究工作证实哪种方通则对SCLC的CTCs侦测格外有优势。着眼下一代，急只需开发特异性、特异性格外高的CTCs侦测电子技术，为SCLC的坚实和药理学研究工作造成了格外是。

二、CTCs在SCLC药理学系统设计之前的研究工作状况

（一）CTCs计算与SCLC的诊疗、依此

近年来多项研究工作表明CTCs计算总体与SCLC的诊疗、依此有密切关系关系0 2009年Tanaka等系统设计CeIISearch通则侦测了1 50则有7.5ml外周噬CTCs，其之前胃癌1 25则有、非恶性25则有，胃癌病变以外116则有非小细胞就会胃癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9则有SCLC。

研究工作结果表明SCLC病变CTCs阳性率为66.70-/0（6则有／9则有），显著很低NSCLC病变的CTCs阳性率(白血病25.9%，鳞癌40.9%；白血病对比SCLC，P

同年，Hou等系统设计CeIISearch通则侦测了50则有初治的SCLC病变外周噬CTCs，以外20则有限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病变和30则有为广泛期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病变，总体线期ED-SCLC及LD-SCLC病变的之前位CTCs计算共五237和2个/7.5ml噬，7则有未检出CTCs的病变均为LD-SCLC，验证CTCs计算总体与SCLC依此关的。

近似于的论证在2012年被日本人研究工创作者Naito等证实，研究工创作者在51则有SCLC病变之前立用CeIISearch通则侦测总体线期CTCs总体，结果表明ED-SCLC,病变的之前位CTCs计算为9.5个f 7.5ml噬，而LD-SCLC仅为1个／7.51111噬，再进一步验证ED-SCLC病变的CTCs总体很低LD-SCLC病变。

（二）CTCs审核SCLC的及猎食率

CTCs到底可作为审核SCLC和猎食率的有救指f,匙研究工创作者们始终在阐释的情况。Houi等在2009年通过CellSearch通则侦测了50则有SCLC病变(LD-SCLC20则有，ED-SCLC30则有)的CTCs，推测CTCs>300个/7.5ml噬的病变及CTCs

总体线期CTCs>=50和

在该研究工作之前SCLC病变的猎食率并不一定个数预设8个/7.5ml噬，以此将病变分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年除此以外系统设计CellSearch通则侦测59则有SCLC病变在总体线期、1略长周期疗程后及4略长周期疗程结束后外固噬CTCs总体，其之前ED-SCLC病变38则有，LD-SCLC病变2 1则有c总体线期有43则有病变(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml噬，CTCs>215个/7.5ml噬和CTCs

经过1略长周期疗程后病变CTCs总体显著降低，且1略长周期疗程后CTCs

研究工创作者推断CTCs总体是SCLC猎食率的独立国家阻碍表征，其之前1略长周期疗程后CTCs总体是SCLC和猎食率强悍的预期表征。

2013年ASCO发表的ECOG1508研究工作之前，研究工创作者先前在155则有ED-SCLC之前加入凋亡用药，并对其之前123则有病变总体线期CTCs完成侦测，结果表明凋亡用药未延长ED-SCLC病变的PFS和OS，但推测总体线期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml噬的mPFS共五4.4和4.3个月（P=0.07），OS共五10.7和7.2个月(P=0.01)。研究工创作者并不认为虽然凋亡用药没通则能提高ED-SCLC病变的PFS和OS，但却推测了CTCs不太可能是SCLC病变的猎食率多种类型。

都只，Igawa等先前系统设计OBP-401试验性侦测SCLC病变外周噬CTCso系统设计OBP-401试验性侦测结核病和胃癌病变CTCs的关的研究工作才有晚期报道。研究工作纳入30则有韧治的SCLC病变，29则有病变(96%)外周噬CTCs阳性。在总体线期，21则有病变CTCs

（三）CTCs监控SCLC的罹患和分散

原有的研究工作表明通过侦测CTCs的用到来监控SCLC的罹患和分散不具备不可或缺的药理学意味o Tanaka等研究工作推测CTCs总体‘j 125则有胃癌病变（以外9则有SCLC病变）方面显著关的，特别是与恰好分散密切关系（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，创作者并不认为CTCs可作为监控胃癌恰好分散的生命体标记物。Natio等研究工作推测SCLC在总体线期、用药结束后及罹患后CTCs的阳性率共五68.6%、26.5%和67.6，高亮SCLC罹患后外周学CTCs总体升高，再次发生恰好分散脊柱的可有为0、1和>=2的病变其之前位CTCs计算共五2.0、7.5和21个/7.5ml噬,高亮CTCs总体与恰好分散脊柱的可有有关，恰好分散越远多，CTCs计算越远高（p

三、CTCs在SCLC药理学系统设计之前的探讨路径

罹患和分散是导致病变用药惨败和丧命的主要或许，及时推测的罹患和分散并采敢积极有效的用药措施可突出提高病变猎食率。然而，由于SCLC缺乏都能监控罹患和分散的生命体多种类型，且常规影像学检查无通则推测不显分散灶及均匀分布残留病灶，导致再次发生罹患和分散的SCLC病变没法及时遵从诊疗和用药。

药理学之前以外LD-SCLC的病变猎食率差异较大，高亮有些限于期的病变在诊疗时不太可能已再次发生了影像学没法推测的不显分散而视作潜在的为广泛期病变。通过侦测外周噬CTCs的用到及可有推移从而对SCLC病变体内状态完成高分辨率、动态地监控和赞扬，及时推测的罹患、分散，将有助于药理学医生对用药马上的洞察和用药解决建议的选择，但究竟CTCs的可有或推移个数为多少时都能精确突显SCLC的罹患或分散尚能不明确，并不只需要格外多的循证现代医学证据给以支持。

CTCs在审核SCLC病变用药方面的系统设计尚能处于探讨阶段，用药过程之前CTCs可有的推移与SCLC病变疗程的关联性及其与SCLC病变PET马上的选择等情况在下一代只需大量的药理学研究工作。近5年，对CTCs到底可作为SCLC病变猎食率指标的研究工作逐渐有所增加，但SCLC最佳的猎食率CTCs并不一定个数尚能无定论，争议颇多。

其之前3项来自Hou、Naito、Hiltermann的研究工作将SCLC的猎食率CTCs畀定个数分别预设为50、8和2个／7.5ml噬，差异很大，这不太可能与研究工作有别于的生命体学方通则相异以及入组样本量较少有关。未来会比利时研究工创作者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病变分离研究工作，对总体线期、l略长周期疗程后CTCs以及用药前后CTCs的推移个数分别预设猎食率并不一定个数，为下一代的研究工作提供者了新的思路。外间所在的科研团队也亦然不遗余力而今SCLC病变猎食率最佳CTCs并不一定个数的研究工作，结果令人欣慰。

的个体化用药是用药模式的其发展路径。SCLC病变对疗程制剂的反应长期存在显著的个体差异，其主要或许不太可能与复杂的一般而言、特异性差异及基因序列有关。所以，逐步明晰SCLC的基因学特点对实现真亦然意味上的SCLC个体化用药尤为不可或缺。未来会而今研究工创作者王洁等研究工作人员通过系统设计单细胞就会基因测序引为对病变单个CTC完成仅有基因、核苷酸基因测序。

在此项研究工作之前，谢晓亮教授发明的多重退火和环化周而复始的导入电子技术(MAIBAC)，成功实现了对病变外周噬单个CTC的仅有基因导入和深度测序，在单个细胞就会总体探测仅有基因基因拷贝数个体差异(CNVs)和单核苷酸个体差异(SNVs)o单细胞就会总体CTCs基因测序电子技术可及时提供者如耐药基因型等个体化用药所只需的不可或缺信息，同时也为下一代SCLC凋亡制剂的开发提供者电子技术支持。

SCLC组织头颅骨难以受益，受限制了原先各项检查研究工作的开展，而为了让CTCs实现的SCLC周而复始细胞就会移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，年末应对这一棘手难题。都只，Hodgkinson等先前将6则有ED-SCLC病变lOml外周噬之前的CTCs提炼出后注射到病原体缺陷豚鼠牙龈，结果在4只豚鼠人身转变成了CDXs，验证SCLC病变的CTCs不具备致瘤性。

同时系统设计CelISearch通则侦测这6则有SCLC病变的CTCs，结果表明成功转变成CDXs的4则有病变的CTCs计算均>400个／7.5ml噬，而另外2则有未转变成CDXs的病变其CTCs计算共五222和20个／7.5ml噬，高亮SCLC的CTCs致瘤性与外周噬CTCs教量有关。再进一步分析方法推测来得于疗程特异性SCLC，疗程乙型肝炎SCLC病变的CDXs倍增时间略长、生长格外迅速。对3则有CDXs给予顺铂和遥相呼应泊苷疗程制剂，其特异性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病变的OS共五9.7.3.5.0.9个月，高亮对CDXs完成体内药敏试验性可以间接反应病变猎食时间。

该研究工作表明以外SCLC的外周噬CTCs不具备干细胞就会特点，可完成体内培养、转变成与原发高度近似于的CDXs，为SCLC病变的体内药敏试验性、耐药机制分析方法等一系列检查研究工作提供者了极少量的组织，应对了SCLC病变头颅骨可能不足的情况。

论证

从现引的研究工作可以看出，虽然CTCs在SCLC之前的药理学系统设计仍处于探讨阶段，但前景广阔。迄今为止，诸多转变成性研究工作亦然在完成之前，相信随着研究工作的不断深入，CTCs年末视作SCLC的格外是口，欣慰CTCs在SCLC的领域之前为我们造成了惊喜。

编辑： 雪